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利用大規(guī)模哺乳動物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)具有醫(yī)用價值的生產(chǎn)因子、干擾素、激素、疫苗、單抗和酶等，已成為生物制藥高技術(shù)產(chǎn)業(yè)鏈的核心。由于哺乳動物細胞培養(yǎng)過程中，如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等代謝廢物的積聚，抑制了哺乳動物細胞的生長，大幅提高了哺乳動物細胞的培養(yǎng)成本。如何及時去除這些代謝物，優(yōu)化哺乳動物細胞培養(yǎng)環(huán)境，進而提高哺乳動物細胞產(chǎn)率、降低動物細胞培養(yǎng)成本和生物制品的成本，是生物醫(yī)藥制品規(guī)?；a(chǎn)和普及亟待解決的問題，具有重要的應(yīng)用價值。
針對上述問題，本論文選取Vero(非洲綠猴腎細胞)哺乳動物細胞株為研究對象，通過細胞相對活性、生長狀態(tài)變化、乳酸脫氫酶濃度以及細胞凋亡對納米級凹凸棒土(NATP)的生物學(xué)毒性進行評價，并對其與哺乳動物細胞的作用機制進行探索性研究。具體研究內(nèi)容如下：
(1)納米級凹凸棒土制備方法研究。分別利用六偏磷酸鈉、鹽酸和聚丙烯酸鈉結(jié)合超聲方法對工業(yè)化用的凹凸棒土進行二次分散提純，通過FTIR、TEM和Zeta電位對制備的納米級凹凸棒土顆粒進行評價。研究結(jié)果表明三種處理方法中，聚丙烯酸鈉分散獲得的凹凸棒土穩(wěn)定性最好，其次是六偏磷酸鈉分散處理凹凸棒土，穩(wěn)定性最不好的是鹽酸分散處理的凹凸棒土。
(2)納米級凹凸棒土細胞毒性研究。通過與納米級凹凸棒土共培養(yǎng)的Vero哺乳動物細胞的生長狀態(tài)、細胞相對活性、細胞的凋亡、DNA的電泳、及培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶的濃度變化等方面的實驗，對納米級凹凸棒土細胞毒性進行研究。研究結(jié)果表明：在一定的濃度范圍內(nèi)，納米凹凸棒土材料對細胞幾乎沒有毒性作用，反而促進細胞的增殖生長。
(3)納米級凹凸棒土與細胞相互作用機制的初步探索。通過FTIR、XPS等分析方法對與哺乳動物細胞共培養(yǎng)前后的凹凸棒土的物化性質(zhì)進行表征，初步探索天然納米級凹凸棒土調(diào)控哺乳動物細胞培養(yǎng)的作用機制。研究結(jié)果表明：納米級凹凸棒土可以有效降低細胞中的有害代謝產(chǎn)物的濃度，優(yōu)化哺乳動物細胞培養(yǎng)環(huán)境，調(diào)控細胞對營養(yǎng)物質(zhì)的攝取，提高細胞生長增殖的效率。

    關(guān)鍵詞：
    納米級凹凸棒土 細胞毒性 生物效應(yīng) Vero細胞系 生物制藥
    作者：
    賀麗
    學(xué)位授予單位：
    北京交通大學(xué)
    授予學(xué)位：
    碩士
    學(xué)科專業(yè)：
    生物物理學(xué)
    導(dǎo)師姓名：
    丁克儉
    學(xué)位年度：
    2012
    語種：
    中文
    分類號：
    TB383 TQ460.6
    在線出版日期：
    2012年12月31日